كيف يتم تقييم التأثير المضاد للعفن لعامل الجلد المضاد للعفن؟
يتضمن تقييم التأثير المضاد للفطريات للعامل المضاد للفطريات الجلدي عمومًا جانبين. من ناحية أخرى ، الكشف عن فعالية العامل المضاد للفطريات ، والغرض الرئيسي منه هو تحديد ما إذا كان الدواء لديه القدرة على تثبيط أو قتل العفن.
تشمل طرق التقييم الشائعة الاستخدام: طريقة منطقة التثبيط ، طريقة صب الألواح ، طريقة البكتريا الموضعية ، طريقة ثقافة التخفيف ، طريقة الانتشار ، تحديد الحد الأدنى من التركيز المثبط (MIC) ، إلخ ؛ من ناحية أخرى ، التأثير المضاد للفطريات بعد إضافة مثبط العفن الفطري إلى الجلد تشمل طرق التقييم المخبرية الشائعة الاستخدام: طريقة منطقة التثبيط ، وطريقة التعرض الطبيعي ، وطريقة التعليق بالغرفة الرطبة ، وطريقة دفن التربة ، والطريقة المتوسطة ، وما شابه.
في الوقت الحاضر ، طرق التقييم المخبرية التي يستخدمها الدباغون بشكل متكرر هي كما يلي.
(1) طريقة منطقة التثبيط
باستخدام ورق مستدير أو قشرة مستديرة (قطرها عمومًا من 2 إلى 4 سم) ، مغمورة أو مغمورة في تركيز معين من محلول العامل المضاد للعفن لفترة من الوقت ، ثم تعلق بثقافة طلاء بكمية معينة من تعليق بوغ العفن في مركز الصفيحة ، ثم احتضانها لفترة زمنية عند درجة حرارة (28 ± 1) درجة مئوية ، الرطوبة النسبية ≥ 95٪ ، لاحظ وجود أو عدم وجود منطقة تثبيط شفافة حول الورقة المستديرة أو الجلد المستدير ، أو استخدم فرجار Vernier لقياس قطر دائرة الفطر. طريقة منطقة التثبيط هي فقط طريقة نوعية أو شبه كمية ، ويتأثر حجم منطقة التثبيط بقدرة مثبط القالب على الانتشار على لوحة أجار (مع طبيعة مثبط القالب ، مذيب مثبط العفن المذاب في مثبط العفن) النوع ، يتأثر بشكل كبير تكوين الوسط ، وتوزيع العامل المضاد للفطريات في الجلد ، وظروف الاستزراع ، وبالتالي يكون التأثير المرجعي محدودًا. ومع ذلك ، تتميز هذه الطريقة أيضًا بمزايا التشغيل البسيط ، والتي يمكن التعرف عليها بالعين المجردة ، والرؤية الجيدة ، وما شابه ، وغالبًا ما تستخدم للتقييم الأولي للتأثير المقاوم للعفن لمثبط العفن.
(2) طريقة التركيز المثبط الأدنى (MIC)
تتم صياغة مثبط العفن الفطري الاختباري في سلسلة من التركيزات ، ثم يتم إخراج 1 مل بطريقة معقمة ، وتضاف إلى طبق المزرعة المعقم ، ثم يتم حقن 1 مل من المعلق البكتيري الاختباري في كل طبق استنبات (أو عن طريق حلقة التلقيح) يتم وضع خط معلق لسلالة الاختبار على صفيحة أجار المتوسطة التي يضاف إليها مبيد الفطريات وترسيخها ، وأخيراً ، يتم حقن وسط أجار محدد مسبقًا 40 درجة مئوية في كل طبق من أطباق المزرعة ، ويتم خلطه وتخثره بشكل موحد. يتم وضعه في بيئة ذات درجة حرارة (28 ± 1) درجة مئوية ورطوبة نسبية 95٪ لفترة زمنية (بشكل عام من 3 إلى 5 أيام) ، ويمكن فحص أقل تركيز للأنواع المختبرة و مقارنة. طريقة MIC هي طريقة كمية ، والتي يمكن أن تعكس بشكل أفضل ضراوة العامل المضاد للفطريات وتسهيل مقارنة التأثيرات المضادة للعفن بين العوامل المضادة للفطريات المختلفة. إنها واحدة من أكثر طرق التعبير عن الفوعة شيوعًا. ومع ذلك ، هناك العديد من العوامل التي تؤثر على قيمة MIC ، مثل مصدر سلالة الاختبار ، وكمية اللقاح ، وعدد جراثيم العفن في تعليق بوغ العفن ، والوسيط ، ونوع المذيب الذي يتم فيه إذابة مثبط العفن ، و ظروف الاستزراع ، وما إلى ذلك ، لذلك يجب إجراء MIC لمانع العفن في نفس الظروف.
(3) طريقة تعليق الغرفة الرطبة
يتم رش الجلد المعالج بمضاد العفن (عادةً مربع طويل يبلغ 2.5 سم × 5.0 سم) على سطح الجلد برذاذ القالب لتعليق البوغ ، ثم يتم تعليقه في درجة حرارة ثابتة وغرفة رطوبة. كانت درجة الحرارة (28 ± 1) درجة مئوية ، والرطوبة النسبية ≥ 95٪] مزروعة لمدة 28 يومًا ، ولوحظت حالة العفن بانتظام ، وتم الحكم على تأثير العفن لمثبط العفن من خلال حالة العفن الطويلة للجلد.
السلالات المختبرة بشكل عام هي الرشاشيات النيجر ، الرشاشيات فلافس ، البنسليوم السترينوم ، البنسليوم الفوليجينيا والتريكوديرما. طريقة القياس هذه عبارة عن اختبار سريع يحاكي البيئة الطبيعية. مقاومة قالب العينة هي 0 أو 1 درجة ، والأخرى غير مؤهلة. كل من هذه الأساليب لها مزاياها وعيوبها. بالنسبة لنفس العامل المضاد للعفن ، يمكن استخدام طرق تقييم مختلفة. قد لا تكون النتائج هي نفسها. حتى إذا تم استخدام نفس الطريقة ، فستكون النتائج مختلفة بسبب ظروف مختلفة مثل الوقت والمكان والاختبار. اختلافات. لذلك ، فإن طرق الاختبار المتسارعة لهذه المختبرات لها قيمة مرجعية معينة فقط ، ويجب أيضًا التحقق من أداء التطبيق الحقيقي للعامل المضاد للفطريات من خلال التطبيق العملي.
